Выращивание углеводородокисляющих бактерий для очистки нефтезагрязненных почв | Статья в журнале «Молодой ученый»

Отправьте статью сегодня! Журнал выйдет 16 марта, печатный экземпляр отправим 20 марта.

Опубликовать статью в журнале

Авторы: ,

Рубрика: Экология

Опубликовано в Молодой учёный №18 (413) май 2022 г.

Дата публикации: 03.05.2022

Статья просмотрена: 101 раз

Библиографическое описание:

Тусупова, Ж. Б. Выращивание углеводородокисляющих бактерий для очистки нефтезагрязненных почв / Ж. Б. Тусупова, Д. Е. Мелдекул. — Текст : непосредственный // Молодой ученый. — 2022. — № 18 (413). — С. 524-525. — URL: https://moluch.ru/archive/413/91004/ (дата обращения: 04.03.2024).



В статье авторы представляют способы выращивания организмов-деструкторов для очистки почв. Выделены и проведены скрининг активных штаммов-деструкторов и их способность к росту в присутствии нефти.

Ключевые слова: нефть, почва, углеводородокисляющие бактерии, биоремедиация.

Результаты анализа зависят от правильного отбора проб и их предварительной обработки. ИСО 10381–1 и ГОСТ 28168 устанавливают основные принципы, которые необходимо соблюдать при отборе образцов. Места отбора проб почвы на исследуемой территории намечают по координатной сетке с равными расстояниями. Среднюю смешанную пробу составляют из нескольких десятков проб.

Для получения средней пробы проводятся следующие манипуляции — сначала почву высыпают на лист бумаги тонким слоем, разрушают крупные сгустки почвы, далее удаляют из нее твердые включения, такие как кости, корни, раковины, а после этого делят почву на квадраты шпателем. Из каждого квадрата отбирают лопаточкой небольшое количество почвы, так, чтобы по возможности захватить всю толщину слоя. Растирание образца проводят в фарфоровой ступке. Далее растертый образец почвы просеивается через сито с диаметром отверстий в 1 мм до полного ее просеивания. Мелкозем диаметром 1 мм. (скелет почвы) помещают в бумажные пакеты с указанием номера разреза, макета его заложения и глубины взятия образца.

На среде мясопептонного агара была определена численность гетеротрофных микроорганизмов. Учет выросших колоний бактерий был проведен на 3–10 сутки с момента начала эксперимента.

Количество клеток выражается в количестве клеток или колониеобразующих единиц на 1 грамм сухого образца. Расчет средней арифметической и стандартного числа производился при n=6, p<0,01.

Выделение УОБ. Выделение бактерий из почв с территории Западно-Казахстанской области месторождения Карповский Северный Блок проводилось методом накопительных культур на питательной среде Ворошиловой-Диановой состава: (г/л) NH 4 NO 3– 1,0, K 2 HPO 4– 1,0, KH 2 PO 4– 1,0, MgSO 4– 0,2, CaCl 2 ·6H 2 O — 0,02, FeCl 3 следы, pH = 7,0–7,2. В качестве источника энергии для бактерий использовали нефть в количестве 1 %.

Выделение чистых культур УОБ проводилось чашечным методом на питательной среде рыбо-пептонного агара при 28°С.

Рост микроорганизмов в присутствии углеводородов.

Способность выделенных УОБ расти на нефти, как на единственном источнике энергии для жизнедеятельности изучалась на питательной среде Ворошиловой-Диановой. Для этого в колбы Эрленмейера со 100 мл стерильной средой вносилось по 10 мл одной суточной культуры бактерий (инокулята) и добавлялось по 1 % нефти. Рост численности бактерий оценивался визуально по 5-бальной шкале на 14-е сутки эксперимента.

Выявление различных групп бактерий проводилось методом посева почвенной суспензии на питательной среде мясопептонного агара.

Сообщества бактерий, использующих в качестве энергии и углерода углеродсодержащие соединения (гетеротрофные бактерии) учитывались на питательной среде мясопептонного агара. Посевы выдерживались при температуре 28–30°С в течение 5–14 дней.

Таблица 1

Численность различных групп бактерий в отобранных образцах почвы

Группы микроорганизмов

Численность микроорганизмов, КОЕ/г

Контроль, 10 3

5 г/ кг

почвы, 10 4

7 г/кг

почвы, 10 4

Гетеротрофные бактерии

54,2±1,2

21,3±1,1

14,9±1,4

Спорообразующие бактерии

7,3±0,8

0,33±0,03

-

Актиномицеты

0,5±0,04

0,15±0,02

-

а) контроль

б) почва 5г/ кг

в) почва 7 г/кг

Рис. 1. Группы микроорганизмов в нефтезагрязненных образцах почвы

Содержание гетеротрофных микроорганизмов в контрольной почве намного выше, чем в нефтезагрязненных образцах: 54,2±1,2×103. Количество спорообразующих бактерий в контрольной почве 7,3±0,8×103 намного превышало их количество в нефтезагрязненном образце с 5 г/ кг. Количество актиномицетов 0,15±0,02×104 в почве с 5 г/ кг нефти намного ниже, чем в контроле 0,5±0,04×103. В образце с 7 г/кг нефти спорообразующие бактерии и актиномицеты выявлены не были.

В результате проведенной работы было выделено 178 изолятов, отличавшихся по форме, размеру, цвету и характеру поверхности колоний. В основном обнаруживались колонии микроорганизмов белого и кремового цвета. Около 70 % колоний имели гладкую поверхность, остальные — шероховатую.

Литература:

  1. Файзов К. Ш., Раимжанов М. М., Алимбеков Ж. С. Экология Мангышлак-Прикаспийского нефтегазового региона. Алматы. 2003.
  2. Оценка воздействия на окружающую среду биологического продукта, окисляющего нефть. ТОО «ЭКО-САФ», Атырау, 2018 год.
  3. О. А. Гоголева, Н. В. Немцева. Углеводородокисляющие микроорганизмы природных экосистем. Вестник Оренбургского научного центра Уральского отделения Российской академии наук (электронный журнал), 2012, № 2.
  4. Аббасян Ф. Изменения биоразнообразия в микробной популяции почв, загрязненных сырой нефтью / Ф. Аббасян, Р. Локингтон, М. Мегарадж, Р. Найду // Современная микробиология. — 2016. — Т. 72. — №. 6. — С. 663–670.
  5. Лим М. В. Комплексное руководство по технологиям восстановления загрязненных нефтью почв — текущие работы и будущие направления / М. В. Лим, Э. Фон Лау, П. Э. По // Бюллетень загрязнения моря. — 2016. — Т. 109. — С. 14–45.
  6. Ахмадиев М. В. Применение нативных штаммов углеводородокисляющих микроорганизмов в биоремедиации нефте-загрязненных почв и грунтов / М. В. Ахмадиев// Вестник Пермского национального исследовательского политехнического университета. Прикладная экология. Урбанистика. — 2014. — № 2(14). — С. 119–130.
Основные термины (генерируются автоматически): питательная среда, мясопептонный агар, почва, HPO, бактерия, группа микроорганизмов, кг нефти, контрольная почва, различная группа бактерий.


Похожие статьи

Исследование наличия микроорганизмов на руках человека

Наука микробиология изучает различные бактерии и вирусы, а также плесени и дрожжи

В данном эксперименте использовалась простая питательная средамясо-пептонный агар

В статье рассматривается рост микроорганизмов на питательных средах с добавлением...

Поиск и выделение активных штаммов деструкторов нефти...

Микробиологическая рекультивация загрязненных нефтью почв основывается на двух подходах: активизации аборигенной микрофлоры почвы или интродукции адаптированных к загрязнителю и условиям внешней среды штаммов нефтеокисляющих микроорганизмов [1].

Удешевление питательной среды для культивирования...

Проведена сравнительная оценка таких питательных сред как: питательная среда LB, являющаяся одной из основных для культивирования бактерий рода Pseudomonas; питательная среда Кинг В, также применяемая для культивирования бактерий рода...

Микробиологический анализ воздуха в школьном помещении

В воздух микробы попадают в основном с поверхности почвы вместе с пылинками, частично — их

При определении общей микробной обсемененности чашки с мясопептонным агаром

В своем первом исследовании мы обнаружили, что в контрольном варианте (то есть до начала...

Способы очистки почв от загрязнения нефтью...

Главной характеристикой почвы является плодородие, которое формируется, за счет жизнедеятельности микроорганизмов.

Одну из важных сторон ремедиации (очистки) загрязненной почвы нефтью выполняют микроорганизмы (МО) почвы.

Особенности биологической активности мерзлотных почв...

Сравнение биологической активности почв иколичества бактерий игрибов на разных глубинах.

Почва — сложный субстрат. Точно определить факторы, которые регулируют. Численность и качественный состав микроорганизмов в почве зависит также и от сезона года.

Подбор оптимальной питательной среды для разработки...

Для оценки оптимального варианта питательной среды с целью наращивания биомассы молочнокислых микроорганизмов провели опыты по их культивированию на молочной сыворотке с использованием пророщенного зерна различных культур.

Интенсификации роста стартовых культур в технологии...

Для определения влияния электромагнитного излучения на стартовые культур был проведен микробиологический анализ по показателям роста микроорганизмов на мясо-пептонном агаре. Используемая среда для первоначального развития микрофлоры по проведенным...

Микроорганизмы в почве | Статья в журнале «Молодой ученый»

Почва — сложный субстрат. Точно определить факторы, которые регулируют микробиологические процессы в ней

Численность и качественный состав микроорганизмов в почве зависит также и от сезона года. К примеру, почти во всех типах почв резко увеличение...

Особенности воздействия углеводородов нефти на санитарное...

Почва — очень благоприятная среда для развития микроорганизмов.

Выбор микроорганизмов для характеристики санитарного состояния почв был сделан на основе

При концентрации нефти 5 г/кг на 14 сутки было обнаружено максимальное количество клеток...

Похожие статьи

Исследование наличия микроорганизмов на руках человека

Наука микробиология изучает различные бактерии и вирусы, а также плесени и дрожжи

В данном эксперименте использовалась простая питательная средамясо-пептонный агар

В статье рассматривается рост микроорганизмов на питательных средах с добавлением...

Поиск и выделение активных штаммов деструкторов нефти...

Микробиологическая рекультивация загрязненных нефтью почв основывается на двух подходах: активизации аборигенной микрофлоры почвы или интродукции адаптированных к загрязнителю и условиям внешней среды штаммов нефтеокисляющих микроорганизмов [1].

Удешевление питательной среды для культивирования...

Проведена сравнительная оценка таких питательных сред как: питательная среда LB, являющаяся одной из основных для культивирования бактерий рода Pseudomonas; питательная среда Кинг В, также применяемая для культивирования бактерий рода...

Микробиологический анализ воздуха в школьном помещении

В воздух микробы попадают в основном с поверхности почвы вместе с пылинками, частично — их

При определении общей микробной обсемененности чашки с мясопептонным агаром

В своем первом исследовании мы обнаружили, что в контрольном варианте (то есть до начала...

Способы очистки почв от загрязнения нефтью...

Главной характеристикой почвы является плодородие, которое формируется, за счет жизнедеятельности микроорганизмов.

Одну из важных сторон ремедиации (очистки) загрязненной почвы нефтью выполняют микроорганизмы (МО) почвы.

Особенности биологической активности мерзлотных почв...

Сравнение биологической активности почв иколичества бактерий игрибов на разных глубинах.

Почва — сложный субстрат. Точно определить факторы, которые регулируют. Численность и качественный состав микроорганизмов в почве зависит также и от сезона года.

Подбор оптимальной питательной среды для разработки...

Для оценки оптимального варианта питательной среды с целью наращивания биомассы молочнокислых микроорганизмов провели опыты по их культивированию на молочной сыворотке с использованием пророщенного зерна различных культур.

Интенсификации роста стартовых культур в технологии...

Для определения влияния электромагнитного излучения на стартовые культур был проведен микробиологический анализ по показателям роста микроорганизмов на мясо-пептонном агаре. Используемая среда для первоначального развития микрофлоры по проведенным...

Микроорганизмы в почве | Статья в журнале «Молодой ученый»

Почва — сложный субстрат. Точно определить факторы, которые регулируют микробиологические процессы в ней

Численность и качественный состав микроорганизмов в почве зависит также и от сезона года. К примеру, почти во всех типах почв резко увеличение...

Особенности воздействия углеводородов нефти на санитарное...

Почва — очень благоприятная среда для развития микроорганизмов.

Выбор микроорганизмов для характеристики санитарного состояния почв был сделан на основе

При концентрации нефти 5 г/кг на 14 сутки было обнаружено максимальное количество клеток...

Задать вопрос