Влияние спиртовой настойки клубня Arum korolkowii Regel на гематологические и биохимические показатели крови самцов морских свинок

Данная статья отражает результаты научного исследования студента магистратуры, где получены положительные результаты того, что 10 %-ная настойка клубня Arum korolkowii Regel на 70 %-ном этиловом спирте повышает уровень тестостерона в сыворотке крови у самцов морских свинок.

Ключевые слова: клубень, Arum korolkowii Regel, 10 % спиртовая настойка, биохимия сыворотки крови, тестостерон, морская свинка.

Введение

Одним из лекарственных растений, часто используемых в народной медицине Средней Азии с древнейших времен, которое не утратило свою актуальность и в настоящее время, является Arum korolkowii Regel. В народе это лекарственное растение называют кучала. Растение очень ядовито, и в народной медицине в качестве лекарственного сырья используются настойки клубней в малых дозах для повышения потенции человека [1, 7]. Лечебные свойства этого растения упоминаются в трудах Авиценны [4], а также в кыргызских народных эпосах «Манас» [5, 6] и «Семетей» [3]. Однако в литературе до сих пор не имеется научных данных, доказывающих лечебные свойства данного лекарственного растения.

Среди различных лабораторных животных морская свинка имеет много общего с физиологией человека [8, 20], в том числе по многим общим признакам репродукции человека [10, 11, 12, 17, 18, 19]. Доказано, что содержание тестостерона в сыворотке крови морских свинок в постнатальном периоде онтогенеза неодинаково [14, 16]. Морские свинки также были использованы как животная модель для изучения патологии предстательной железы человека [9]. В целом морские свинки использовались во множестве исследовательских работ, включая биохимические, физиологические и фармакологические тесты [13].

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния настойки клубня Arum korolkowii Regel на гематологические и биохимические показатели сыворотки крови самцов морских свинок.

Материал иметоды

Клубни Arum korolkowii Regel измельчали с помощью ручной мясорубки и из них готовили 10 %-ную настойку на 70 %-ном этиловом спирте. Настойку разливали в темную стеклянную бутылку, закрытую плотной крышкой, и помещали в темное место при комнатной температуре. Каждый день по два раза ее смешивали, и этот процесс продолжался в течение 14 дней. На 15-й день настойку процеживали через плотную марлю, а затем фильтровали через фильтровальную бумагу. Приготовленную спиртовую настойку хранили в холодильнике (+4 °С).

Клинически здоровых 22 самцов абиссинской породы морских свинок, одинакового возраста (48 недель) и весом в среднем 682 г (489–792 г), приобрели у частного производителя. Подопытные животные были размещены в двух самодельных клетках-изоляторах размером 98,7 см х 347,89 см х 54,3 см для 10 контрольных животных и 110,3 см х 398,73 см х 54,6 см для 12 экспериментальных животных на протяжении всего эксперимента. Морские свинки имели свободный доступ к пище и воде. Условия содержания и питания животных осуществлялись в соответствии с ранее описанным руководством [15].

В течение адаптационного периода (10 дней) мы наблюдали за поведением морских свинок и по их физической активности, по массе тела разделили их на две равные группы. Контрольную группу составили 10, а экспериментальную 12 особей самцов. Обе группы содержались в одинаковых условиях. Ежедневно с 8:00 по 9:00 часов подопытным животным перорально давали 0,15 мкл спиртовой настойки, а контрольной группе 0,15 мкл обычной воды в течение 30 дней. На 31-й день животных анестезировали парами эфира, вскрыли грудную клетку и забрали 3–4 мл крови из сердца в пробирки Gel/Clot Activator (GD060SGC) для исследования сыворотки крови, и в EDTA.K3 (GD060EK3) для общего анализа крови.

Анестезированных животных убивали путем обескровливания и вскрывали по общепринятой методике [2]. После тщательного осмотра все внутренние органы были извлечены, в том числе семенники и печень, и изучены их макроскопические данные.

Мы проанализировали данные с помощью программы Microsoft Excel 2007 по следующим гематологическим и биохимическим показателям плазмы крови: количественное и процентное содержание белых кровяных клеток, нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов, базофилов, эритроцитов, гематокрита, гемоглобина и кровяных пластинок (тромбоцитов); концентрации глюкозы, АЛТ, АСТ и тестостерона. Для всех анализов Р < 0,05 считался статистически значимым.

Результаты

Этология. Животные, как контрольной, так и экспериментальной групп, вели активный образ жизни, часто бегали и играли, дрались между собой, хорошо питались. Однако подопытные животные проявляли большую подвижность, повышенный аппетит, часто дрались между собой, бегали и играли.

Гематология. В сравнительном аспекте были изучены общие гематологические показатели контрольных и экспериментальных морских свинок (Таблица 1).

Таблица 1

Гематологические показатели контрольных иэкспериментальных групп морских свинок

Примечание: *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001.

Отдельные гематологические показатели морских свинок значительно отличались между контрольной и экспериментальной группами животных (Таблица 1). Так, количество нейтрофилов у экспериментальных морских свинок было значительно ниже, чем у контрольных животных (Р > 0,001). Количество лимфоцитов наоборот, было значительно выше у подопытных особей (Р < 0,001). Процент гематокрита и гемоглобина были выше у экспериментальных самцов морских свинок, чем у контрольных особей. Другие вышеизложенные параметры крови статистически были незначимыми.

Биохимия плазмы крови. У всех 22 исследованных животных были проанализированы концентрации глюкозы, АЛТ (Аланинаминотрансфераза), АСТ (Аспартатаминотрансфераза) и тестостерона в сыворотке (Таблица 2).

Отдельные биохимические показатели контрольных иэкспериментальных групп морских свинок

Примечание: *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001

Как видно, концентрация АЛТ и АСТ была значительно снижена у экспериментальных животных, чем у контрольных морских свинок (обе Р > 0,001). А изменение концентрации глюкозы в плазме крови статистически было не достоверным, т. е. почти не наблюдалось у обеих групп. Тестостерон у экспериментальных самцов был значительно повышен.

Вскрытие. При вскрытии животных обеих групп было тщательно осмотрено анатомическое расположение, форма, цвет, объем, консистенция всех внутренних органов, особенно сердца, печени, лимфатических узлов, селезенки и семенников. Результаты макроскопических исследований не выявили каких-либо визуальных патологий или различия между контрольной и экспериментальной группами животных.

Заключение. Анализируя результаты исследования можно заключить, что 10 %ная спиртовая настойка клубня Arum korolkowii Regel действительно оказывает положительное действие на репродуктивную функцию морских свинок, свидетельством того служит значительное повышение концентрации тестостерона в сыворотке крови у экспериментальных самцов. Кроме того, настойка значительно повышает содержание гемоглобина в крови, возможно улучшает работу печени и сердца (понижение АЛТ И АСТ), чем и доказывает полезность данной настойки. А повышение количества лимфоцитов и гематокрита можно считать реакцией организма на длительный прием данной настойки.

Литература:

1. Кенжебаева Н. И., Жаныбаева М. А. Лекарственные растения Кыргызстана в народной медицине. Fen Bilimleri Dergisi. Özel Sayı: 10 2009. P. 99–103.
2. Коптева К. Е., Гущин Я. А., Беляева Е. В., Макаров М.Н, Макаров В. Г. Методика вскрытия и удаления органов у лабораторных животных. Отчет 4: морская свинка, песчанка, дегу. Лабораторные животные для научных исследований, № 2. 2019.
3. Мамай Ж. Эпос Семетей. E-book. Added 22.05.2017. С. 573 [на кырг. яз.]. https://new.bizdin.kg/kniga/epos-semetey-variant-zhusupa-mamaya
4. Народный лекарь. Вебсайт традиционной и народной медицины Азиатского лекаря Эргеш ака. http:// lekar.kharkov.ua/.
5. Орозбаков С. Эпос Манас. 2- e -book. С.15 [на кырг. яз.]. https://new.bizdin.kg/knigi/category/sagymbay-orozbakov.
6. Орозбаков С. Эпос Манас. 4- e -book. С.58 [на кырг. яз.]. https://new.bizdin.kg/kniga/epos-manas-akademicheskoe-izdanie-po-variantu-sagymbaya-orozbakova-chetvertaya-kniga.
7. Субанбеков A, Торобеков С. Кучала — натуральная Виагра. № 612. 25 июль — 30 июль, 2014. koom@super.kg. [на кырг. яз.]. https://www.super.kg/article/show/28631.
8. Трегубова НВ. Изучено состояние прооксидантно-антиоксидантной системы печени и крови морских свинок разного возраста при нормальном и экспериментальном холецистите. Автореферат дисс.. Ставрополь, 2004. 24 с.
9. Acosta S ¹ *, Dizeyi N¹, Feinstein R², Pierzynowski S³ & Abrahamsson P-A¹. Long-term testosterone stimulation induces hyperplasia in the guinea-pig prostate. Prostate Cancer and Prostatic Diseases (2004) 7. P. 227–23.
10. Fan Y^a1, Liu Sh^ab1, Chen X^ac, Feng M^a, Song F^a, Gao X^a. Toxicological effects of Nux Vomica in rats urine and serum by means of clinical chemistry, histopathology and 1H NMR-based metabonomics approach. Journal of Ethnopharmacology. Volume 210, 10 January 2018, P. 242–253.
11. Gradela A, Nunes AKR, Martins LFT, Santos JM, Matos, MHT, Gouveia BB, Silva GN and Franzo VS. Estudo morfológico e morfométrico da próstata de cobaios (Cavia porcellus, Linnaeus, 1758) durante o desenvolvimento pós-natal. Biotemas, 2013a, vol. 26, n. 4, p. 221–231.
12. Gradela A, Nunes AKR, Matos MHT, Franzo VS, Faria MD, Moreira MB and Santos JM. Descrição morfológica e morfométrica da glândula vesicular de cobaias durante o desenvolvimento pós-natal. Pesquisa Veterinaria Brasileira, 2013b, vol. 33, n. 7, p. 942–948.
13. Noonan DE. The Guinea Pig (Cavia porcellus). ANZCCART News, Vol. 7. No 3. September 1994. P. 1–8.
14. Nunes,AKR, Gouveia BB, Matos MHT, Pires IC, Franzo VS, Faria MD and Gradela A. Análise morfológica e funcional do processo espermatogênico em cobaios (Cavia porcellus) da pré-puberdade até a pós-puberdade. Pesquisa Veterinária Brasileira, 2013, vol. 33, n. 1, p. 1–7.
15. Nutrient Requirements of Laboratory Animals. Fourth Revised Edition, 1995. Washington (DC): National Academies Press (US); 1995. ISBN-10: 0–309–05126–6.
16. Rigaudie`re N, Pelardy G, Robert A and Delost P. Changes in the concentrations of testosterone and androstenedione in the plasma and testis of the guinea-pig from birth to death. J. Reprod. Fert. (1976) 48, p. 291–300.
17. Rodriguez RE and Wettstein RM. Quantitative study on guinea pig spermatogenesis shows a relative high percentage of early meiotic prophase stages. The Anatomical Record Part A, 2004, vol. 278, n. 1, p. 493–504.
18. Rodriguez-Casuriaga R, Geisinger A, Santinaque FF, López-Carro B and Folle GA. High-purity flow sorting of early meiocytes based on DNA analysis of guinea pig spermatogenic cells. Cytometry, 2011, vol. 79, n. 8, p. 625–634.
19. Suzuki O, Koura M, Noguchi Y, Takano K, Yamamoto Y and Matsuda J. Optimization of superovulation induction by human menopausal gonadotrophin in guinea pigs based on follicular waves and FSH-receptor homologies. Molecular Reproduction and Development, 2003, vol. 64, n. 2, p. 219–255.
20. Williams WR¹, Johnston MS², Higgins S², Izzo AA¹ & Kendall LV, D¹. Blood profiles in unanesthetized and anesthetized guinea pigs (Cavia porcellus).LAB ANIMAL.Volume 45, No. 1 | JANUARY 2016. P. 35–41.