Активность антиоксидантной системы в плазме крови при сахарном диабете II типа

Сахарный диабет — одно из самых распространенных заболеваний в медицинской практике. На сегодняшний день сахарный диабет имеет отрицательную статистику, поскольку его распространённость в мире неуклонно растет. Проведенное исследование показало, что при сахарном диабете II типа происходит активация перекисного окисления липидов.

Ключевые слова: сахарный диабет II типа, оксидативный стресс, перекисное окисление липидов.

Актуальной проблемой современной медицины является тенденция роста установления диагноза сахарный диабет II типа в подростковом возрасте. По данным ГосРегистра рост распространенности сахарного диабета II типа в Российской Федерации за период 2003–2015 г. составляет 2,2 млн. человек.

Сахарный диабет II типа (СД II) — хроническое заболевание, характеризующееся нарушением в углеводном обмене с развитием гиперкликемии, спровоцированное инсулинорезистентностью, а также секреторной дисфункцией β — клеток поджелудочной железы [1].

Выделяют два механизма развития инсулинорезистентности. Рецепторный механизм — нарушение целостности мембран, спровоцированное активацией ПОЛ (свободные радикалы, перекисные соединения); структурные нарушения — конформационные изменения рецепторов инсулина под влиянием продуктов окислительного стресса (МДА и др.) и др.

Пострецепторный механизм — осуществляется за счет снижения проведения сигнала в фосфатидилинозитол-3-киназном пути передачи [2].

Антиоксидантные ферменты осуществляют инактивацию активных форм кислорода и радикалов гидроперекисей липидов, образующиеся при этом продукты не способны инициировать цепные реакции перекисного окисления липидов. К таким ферментам относится: каталаза, супероксиддисмутаза и др.

Цель работы. Изучить активность перекисного окисления липидов при сахарном диабете II типа в плазме крови.

Материалы иметоды.

К 0,1 мл плазмы крови добавляли 2 мл 0,03 % раствора Н2О2. Пробы инкубировали в течение 10 мин при температуре 37⁰С, добавляли 1 мл 4 % молибдата аммония и центрифугировали при 3000 об/мин. Интенсивность окраски измеряли при 410 нм. Параллельно измеряли экстинкцию пробы, содержащей 2 мл перекиси и 0,1 мл физиологического раствора.

Принцип определения активности супероксидидсмутазы (КФ1.15.1.1) основан на способности фермента при рН=10,2 тормозить реакцию окисления адреналина в адренохром [4].

В кювету спектрофотометра вносили 3 мл 0,05М Na-карбонатного буфера, рН=10,2, содержащего 0,05 М ЭДТА и 0,2 мл 0,1 % раствора адреналина. Параллельно готовили пробу, содержащую 3 мл буфера, 0,2 мл 0,1 % раствора адреналина и 0,1 мл плазмы крови. Измеряли прирост оптической плотности при 480 нм. За единицу активности СОД принимали количество фермента, вызывающего 50 % торможение окисления адреналина.

Определение концентрации малонового диальдегида. Метод основан на образовании окрашенного комплекса малонового диальдегида с тиобарбитуровой кислотой [5].

Для исследования брали 0,1 мл плазмы крови, добавляли 1,0 мл 20 % раствора ТХУ и 1,0 мл 0,8 % раствора ТБК. Пробу прогревали 10 мин при 100 0С и центрифугировали. Измеряли интенсивность окраски при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Концентрацию МДА вычисляли в мкмоль/мл.

Оптическую плотностью измеряли с помощью спектрофотометра «СФ — 2000».

Статистическую обработку данных проводили в программном обеспечении SPSS Statistics 17.0.

Результаты исследования. По результатам проведенных исследований было установлено, что при сахарном диабете II типа происходит активация перекисного окисления липидов.

Активность каталазы, супероксиддисмутазы исодержание малонового диальдегида вплазме крови больных сахарным диабетом II типа

При сахарном диабете II типа наблюдается увеличение активности каталазы в 3,74 раза (р<0,05), супероксиддисмутазы в 8,7 раза (р<0,05). Содержание малонового диальдегида увеличилось в 2,97 раз (р<0,05).

Выводы. Результаты проведенных исследований показали, что при сахарном диабете II типа происходит увеличение активности антиоксидантных ферментов, накапливаются продукты окислительного стресса. Проведенный анализ результатов показал достоверное (р<0,05) увеличение показателей перекисного окисления. Перспективой данного исследования может стать применение методик, использованных в исследовании, в контроле за течением сахарного диабета II типа и надобностью назначения антиоксидантных препаратов.

Литература:

1. Сахарный диабет 2 типа. Проблемы и решения: Т. 1 / Александр Сергеевич Аметов. — 3-е изд., перераб. и доп. — Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2015. — 350 с.
2. Д. И. Кузьменко, Т. К. Климентьева; рец. Т. А. Замощина; Сибирский медицинский университет (Томск). — Томск: Сибирский государственный медицинский университет, 2017. — 210 с.
3. Меньшиков, В. В. Лабораторные методы исследования в клинике / Под ред. В. В. Меньшикова.-М.: Медицина, 1987.- 368 с.
4. Брусов, О. С. Метод определения активности СОД / О. С. Брусов // Бюллетень экспериментальной и биологической медицины. — 1976. — № 1. — С. 33–35.
5. Камышников, В. С. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика / В. С. Камышников. — Минск: Интерпрессервис, 2003. — Том 1. — 495 с.